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品牌 | 其他品牌 | 產地 | 國產 |
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級別 | 其他 |
人瘦素(LEP) ELISA試劑盒的實驗原理基于?雙抗體夾心法?的酶聯免疫吸附技術,通過特異性抗體結合樣本中的瘦素分子實現定量檢測。以下是核心原理及關鍵步驟的詳細說明:
BS-0083 人瘦素(LEP) ELISA試劑盒
一、檢測原理?
抗體包被?
微孔板預先包被?抗瘦素單克隆抗體?(捕獲抗體),可與樣本中的瘦素特異性結合?。
夾心復合物形成?
樣本中的瘦素與包被抗體結合后,加入?標記的抗瘦素抗體?(檢測抗體),形成“抗體-抗原-酶標抗體"三明治結構?。
信號放大與顯色?
通過?鏈霉親和素-HRP?結合化抗體,催化底物TMB顯色,顏色深淺與瘦素濃度成正比?。
二、關鍵步驟?
步驟 作用 注意事項
標準品梯度稀釋? 建立標準曲線(濃度范圍通常為0-320pg/mL)? 避免反復凍融,現配現用
洗滌? 去除未結合抗體,減少背景干擾? 拍干孔內液體,防止交叉污染
顯色終止? 2M硫酸終止反應,黃色產物在450nm波長檢測? 終止液需緩慢添加避免氣泡
三、技術特點?
靈敏度?:常規型<10pg/mL,超敏型可達6.1pg/mL?
特異性?:雙抗體設計(單抗+多抗)確保高親和力結合?
樣本兼容性?:適用于血清、血漿、細胞上清等,溶血/脂血樣本需驗證?
四、干擾因素與優化建議?
晝夜節律影響?:瘦素水平在凌晨2:00達峰值,建議固定采血時間?
樣本處理?:避免溶血,EDTA抗凝血漿檢測結果穩定?
試劑穩定性?:HRP酶接觸NaN3會失活,顯色液需避光保存?
注:具體操作需以試劑盒說明書為準,不同品牌抗體組合及檢測范圍可能存在差異?。
注:以上資料僅供參考,如需進一步了解產品詳情,可參考品牌供應商或技術老師。
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